一种用于检测猪瘟病毒的试剂盒,包含RNA酶抑制剂、AMV(禽成髓细胞性白血病病毒)逆转录酶、Taq酶(耐热脱氧核糖核酸聚合酶)、无RNA酶水、One Step RNA PCR(一步RNA聚合酶链反应)混合液、阴、阳性对照以及序列SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:6引物的混合物。本发明在检测过程中将反转录和PCR扩增过程在一步反应中完成,使得检测时间由原来的4-5小时缩短到现在的2-3小时,从而有利于快速检测。同时本发明使用了三对引物,使该方法与普通PCR方法相比具有更高的敏感性,有助于CSFV的防控和隐性带毒动物的剔除,避免造成大范围的传染。所述方法适用于任何实验室和基层各级防控单位、兽医站及大中小型养殖场等。