本发明公开了一套用于区分犬瘟热病毒野毒株与疫苗株的RT-LAMP引物及其应用,所述RT-LAMP引物包括一对外引物和一对内引物,其中,外引物的序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示;内引物的序列分别为SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。以本发明所设计的引物采用RT-LAMP检测方法对各种基因型CDV野毒株进行检测,检测结果均为阳性,而对犬瘟热疫苗株、犬细小病毒以及其他常见犬源病毒检测结果均为阴性。应用本发明引物序列采用RT-LAMP检测方法,可以非常准确地区分CDV野毒株和CDV疫苗株,具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点。