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一种磷酸钙转染HEK293T细胞的方法
- 专利权人:
- 浙江理工大学;嘉兴博泰生物科技发展有限公司
- 发明人:
- 欧文斌,房友荣,施思,孟凡国,李海龙,刘丽
- 申请号：
- CN201410632029.1
- 公开号：
- CN104513832A
- 申请日:
- 2014.11.11
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 翁霁明
- 摘要：
- 一种磷酸钙转HEK293T细胞的方法，该方法包含如下步骤：a.按合适的浓度将HEK293T细胞接种于培养皿，当细胞贴壁完全，长至50％-80％即可开始转染；b.转染前1h换液，用新鲜的完全培养基置换旧的培养基；c.在圆底无菌管中，再加入无菌水，混匀；d.将2×HBS缓冲液与100×PO4混合后，加入上述含DNA-CaCl2溶液的圆底透明管中；e.马上将混合溶液逐滴均匀加入HEK293T细胞中；f.磷酸钙-DNA沉淀加入HEK293T细胞后，再加入转染促进剂处理细胞；g.3-6h后，吸去培养基与DNA沉淀，用1×PBS溶液洗2遍，然后换上新鲜培养基；16-48h后通过荧光观察计算其转染效率。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
