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作物种子的脂肪酶活性精确定量检测方法
专利权人:
中国科学院等离子体物理研究所
发明人:
刘洁,张瑛,吴跃进,余增亮,宋美,任冲,蒋家月
申请号:
CN200610097523.8
公开号:
CN1967212A
申请日:
2006.11.03
申请国别(地区):
中国
年份:
2007
代理人:
余成俊
摘要:
本发明属于一种作物种子脂肪酶活性的定量检测方法,是取作物种子的脂肪酶富集部位,用Tris-HCl缓冲液浸提得到酶提取液;配制乙酸铜、吡啶的水溶液,作为脂肪酸显色剂;以tween-20和橄榄油组成的底物乳化液;取酶提取液加入底物乳化液,在35-37℃水浴震荡至反应完毕,再加入异辛烷混匀,移取有机相,加入显色剂,最后离心取上清液于710nm比色;酶活性管中上清液吸光值的高低对应于脂肪酶活性的高低。通过制定脂肪酸标准曲线,将测得的吸光度和反应体系中脂肪酸浓度的变化对应起来,并通过自定义酶活力单位,将不同样品的脂肪酶活力完全量化。该方法用于精确定量时灵敏度高,稳定性好,重现性好,分辨率高。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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