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作物种子的脂肪酶活性精确定量检测方法
- 专利权人:
- 中国科学院等离子体物理研究所
- 发明人:
- 刘洁,张瑛,吴跃进,余增亮,宋美,任冲,蒋家月
- 申请号:
- CN200610097523.8
- 公开号:
- CN1967212A
- 申请日:
- 2006.11.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2007
- 代理人:
- 余成俊
- 摘要:
- 本发明属于一种作物种子脂肪酶活性的定量检测方法,是取作物种子的脂肪酶富集部位,用Tris-HCl缓冲液浸提得到酶提取液;配制乙酸铜、吡啶的水溶液,作为脂肪酸显色剂;以tween-20和橄榄油组成的底物乳化液;取酶提取液加入底物乳化液,在35-37℃水浴震荡至反应完毕,再加入异辛烷混匀,移取有机相,加入显色剂,最后离心取上清液于710nm比色;酶活性管中上清液吸光值的高低对应于脂肪酶活性的高低。通过制定脂肪酸标准曲线,将测得的吸光度和反应体系中脂肪酸浓度的变化对应起来,并通过自定义酶活力单位,将不同样品的脂肪酶活力完全量化。该方法用于精确定量时灵敏度高,稳定性好,重现性好,分辨率高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/