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一种含草莓ARF4点突变基因的过表达载体的构建方法
- 专利权人:
- 沈阳农业大学
- 发明人:
- 李贺,董向向,梁垚鑫,王矢乔,李艳君,张俊祥,张志宏
- 申请号：
- CN201610395979.6
- 公开号：
- CN106065403A
- 申请日:
- 2016.06.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 王玉信
- 摘要：
- 本发明提供一种含草莓ARF4点突变基因的过表达载体的构建方法其主要特征是，草莓ARF4基因上有miR390靶标ta‑siRNA3的作用位点，能被ta‑siRNA3切割而失去功能，利用快速定点突变技术对ARF4基因进行改造，获得ta‑siRNA3靶标消除但所翻译氨基酸序列不变的ARF4基因过表达载体，再结合转基因技术对ARF4进行功能分析。从‘艳丽’草莓叶片提取RNA，反转录为cDNA，设计引物并利用PCR技术获得ARF4基因的ORF全长，将其进行定点突变，获得突变序列，之后插入pRI101‑AN载体，最终获得草莓ARF4点突变基因的植物过表达载体。其优点是，介绍了草莓ARF4基因克隆及定点突变方法，首次报道了草莓ARF4基因的ORF全长，所构建的草莓ARF4基因过表达载体将为深入分析其功能和作用机制，丰富植物ARF4基因的相关研究奠定重要基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
