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CD28基因过表达载体及其应用
- 专利权人:
- 中国农业大学
- 发明人:
- 索勋,李秋艳,黄广平,刘贤勇,李志远,李向清,付怡静,王一丁,田秀玲,索静霞,胡丹丹,徐邢宾,沈良才
- 申请号：
- CN201510557737.8
- 公开号：
- CN105112449B
- 申请日:
- 2015.09.02
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 王文君
- 摘要：
- 本发明提供一种CD28基因过表达载体及其应用，所述过表达载体是以目标生物基因组为模板，PCR扩增ROSA26基因第一内含子的左、右同源臂，CD28基因表达框，OCT4基因启动子，然后将同源左臂，CD28基因表达框，含LoxP位点的OCT4基因启动子调控的Cre表达框和Neo基因表达框，同源右臂以及负筛选标记DTA依次连接，并构建到真核表达载体上得到。将该载体与含特异性靶向猪ROSA26基因第一内含子的CRISPR/Cas9打靶载体共转入猪胎儿成纤维细胞中，以阳性细胞为供体细胞，卵母细胞为受体细胞，通过体细胞核移植技术获得克隆胚胎；将克隆胚胎移入猪子宫内妊娠获得在ROSA26基因第一内含子定点整合有CD28基因且自动敲除标记基因的转基因猪。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
