[Problem] To provide a method that is for producing a human corneal epithelium sheet for transplantation to corneal disease patients and that is for culturing, on an amnion substrate, human corneal epithelium-derived cells obtained by culturing human corneal epithelium cells. [Solution] A method for culturing human corneal epithelium cells using human mesenchymal stem cells as support cells, and a method for culturing human corneal epithelium cells using a culture medium to which has been added the combination of a ROCK inhibitor, a phosphodiesterase inhibitor, a MAP kinase inhibitor, and a TGF-β receptor antagonist.[Problème] Obtenir un procédé permettant de produire une feuille dépithélium cornéen humain pour transplantation chez des patients atteints de maladies cornéennes et qui permet la culture, sur un substrat damnios, de cellules dérivées dépithélium cornéen humain obtenues par culture de cellules dépithélium cornéen humain. [Solution] La présente invention concerne un procédé pour cultiver des cellules dépithélium cornéen humain au moyen de cellules souches mésenchymateuses humaines en tant que cellule de support, et un procédé pour cultiver des cellules dépithélium cornéen humain au moyen dun milieu de culture auquel a été ajoutée la combinaison dun inhibiteur de ROCK, un inhibiteur de phosphodiestérase, un inhibiteur de MAP kinase, et un antagoniste de récepteur TGF-β.【課題】角膜疾患患者への移植用のヒト角膜上皮シートを製造するための方法であって、ヒト角膜上皮細胞を培養して得られたヒト角膜上皮由来細胞を基質羊膜上で培養するための方法を提供すること。 【解決手段】ヒト間葉系幹細胞を支持細胞として使用するヒト角膜上皮細胞の培養法、及びROCK阻害剤、ホスホジエステラーゼ阻害剤、MAPキナーゼ阻害剤及びTGF-β受容体阻害剤を種々組合わせて添加した培地を使用するヒト角膜上皮細胞の培養法。