The present invention relates to methods for producing protein conjugates containing at least two cysteines. In one embodiment, the disulfide bond-containing protein is reduced to produce two free cysteine residues, followed by reaction with 1,3-dihaloacetone or a similar reagent that binds together the sulfur atoms of the two cysteine residues. The ketone inserted between the sulfur atoms is then used to produce a Schiff base with the aminated payload molecule and, thus, conjugate the protein to the payload. In another embodiment, two cysteine residues are combined by reaction with 1,3-dihaloacetone or a similar reagent. The bond between the sulfur atoms, in each case, keeps the protein or peptide in tight conformation, thus providing a convenient site for attaching the payload with good specificity and efficiency.Настоящее изобретение относится к способам получения конъюгатов белков, содержащих по меньшей мере два цистеина. В одном варианте осуществления белок, содержащий дисульфидную связь, восстанавливают с получением двух свободных цистеиновых остатков с их последующим взаимодействием с 1,3-дигалогенацетоном или подобным реагентом, соединяющим вместе атомы серы двух цистеиновых остатков. Кетон, вставленный между атомами серы, затем используют для получения шиффова основания с аминированной молекулой полезной нагрузки и, таким образом, конъюгирования белка с полезной нагрузкой. В другом варианте осуществления два цистеиновых остатка соединяют путем взаимодействия с 1,3-дигалогенацетоном или подобным реагентом. Связь между атомами серы, в каждом случае, поддерживает белок или пептид в напряженной конформации, предоставляя, таким образом, удобный участок для присоединения полезной нагрузки с хорошей специфичностью и эффективностью.
