一种用于检测PRRSV经典疫苗株的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒及其使用方法,所述试剂盒包含One Step RT-PCR buffer 、酶混合物、阳性对照、无RNA酶水、序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2的引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物,所述使用方法包括使用本试剂盒进行RT-PCR扩增的步骤及评定标准。本发明弥补了PRRSV鉴别诊断上的薄弱环节,建立了特异检测疫苗株的实时定量PRRSV核酸检测。本发明能快速、敏感、准确以及低成本地对猪繁殖与呼吸综合征经典疫苗株病毒进行检测及定量分析。