本发明公开了一种透明质酸裂解酶重组菌及应用,属于基因工程和酶工程技术领域。所述重组菌包括来源于节杆菌Arthrobacter sp.CS01的透明质酸裂解酶HylA基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,连接在其N端的甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶(GAPDH)基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,表达载体pET‑12a(+),宿主菌株大肠杆菌BL21(DE3)。本发明获得的重组酶GAPDH‑HylA与HylA相比,比活力由19.8U/mg增加至25.7U/mg;Km由0.483mg/mL变为0.380mg/mL;最适反应pH由6变为7;最适反应温度由35℃变为45℃;增强了对底物的亲和度及热稳定性,改造后的酶更适合工业应用,可降低生产成本,提高生产效率,且未改变其作用方式。