A method and a system for obtaining a high-resolution image of a volume of a sample using laser imaging are provided. The method includes a step of probing the volume of the sample with a first excitation beam having an intensity profile of maximum intensity at a center thereof, thereby obtaining a positive image of the volume. The method also includes a step of probing the volume of the sample with a second excitation beam having an intensity profile of minimum intensity at a center thereof and defining a peripheral region of maximum intensity around the center, thereby obtaining a negative image of the volume. The method finally includes a step of subtracting the negative image from the positive image, thereby obtaining the high- resolution image of the volume of the sample. Advantageously, embodiments of the invention can be probe- and fluorescence-independent, and be conveniently retrofitted into existing laser imaging systems.La présente invention porte sur un procédé et un système pour obtenir une image à haute résolution dun volume dun échantillon à laide dune imagerie laser. Le procédé comprend une étape de sondage du volume de léchantillon avec un premier faisceau dexcitation ayant un profil dintensité dintensité maximale au centre de celui-ci, obtenant ainsi une image positive du volume. Le procédé comprend également une étape de sondage de volume de léchantillon avec un second faisceau dexcitation ayant un profil dintensité dintensité minimale au centre de celui-ci et définissant une région périphérique dintensité maximale autour du centre, obtenant ainsi une image négative du volume. Le procédé comprend finalement une étape de soustraction de limage négative de limage positive, obtenant ainsi une image à haute résolution du volume de léchantillon. De manière avantageuse, des modes de réalisation de la présente invention peuvent être indépendants de sonde et de fluorescence et être installé en rattrapage de manière commode dans des systèmes dimagerie lase
