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一种用于绵羊卵母细胞体外的筛选培养方法
专利权人:
新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国—澳大利亚绵羊育种研究中心
发明人:
黄俊成,汪立芹,赵云程,陈童,林嘉鹏
申请号:
CN200910113567.9
公开号:
CN101760444B
申请日:
2009.12.08
申请国别(地区):
CN
年份:
2012
代理人:
摘要:
本发明提供的一种用于绵羊卵母细胞体外的筛选培养方法,其一取宰杀半小时内的卵巢,置入温度30-40℃,含青霉素和链霉素的生理盐水中,3小时内清洗3-4次,捡出卵母细胞;用25-30μMol/L的亮甲酚蓝,置于35-39℃水浴中染色85-92分钟,细胞质呈蓝色,用体外成熟液洗涤3-4遍,按25-30枚/滴放入55-78μl/滴的体外成熟培养液中,在5%CO2、95%的条件下培养;其二将体外成熟25-28小时的卵母细胞脱去卵丘细胞;体外受精液洗涤2-4遍,按25-30枚/滴的入50-70μl的受精液滴内;解冻精液,移入受精液,离心4-5分钟弃去上清液,将沉淀的精子,按2-4×106个/ml的密度加入受精液滴,孵育;将受精12-18小时的卵取出,按上步方法处理移入四孔培养板内培养即可。其三所用试剂吸卵液、亮甲酚蓝成熟液、染色液SOF、受精液、培养液、羊血清的必备。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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