Device for fluorescence imaging of a target (20) comprising at least one marker (21), fluorescent in a range of predefined emission wavelengths, said device (1) comprising a first light source (2) d excitation emitting in a wavelength range, a second light source (3) emitting in a wavelength range greater than the range, a control unit, an image acquisition module (5) comprising an image sensor (6) and an optical focusing system (8). The bandwidth image sensor (6) including the wavelength range of the second light source (3), and the control unit is configured to control the first and second light sources (2, 3) according to a lighting sequence comprising an activation of the first light source (2), an absence of activation of the first and second light sources (2, 3) and an activation of the second light source (3) and for sending signals command to the image acquisition module (5). (Figure 2) Dispositif d’imagerie de fluorescence d’une cible (20) comprenant au moins un marqueur (21), fluorescent dans une gamme de longueurs d'onde d’émission prédéfinie, ledit dispositif (1) comprenant une première source lumineuse (2) d’excitation émettant dans une gamme de longueurs d'onde, une deuxième source lumineuse (3) émettant dans une gamme de longueurs d'onde supérieure à la gamme, une unité de pilotage, un module (5) d’acquisition d’image comprenant un capteur (6) d’image et un système (8) optique de focalisation. Le capteur (6) d'image de bande passante incluant la gamme de longueurs d'onde de la deuxième source lumineuse (3), et l’unité de pilotage est configurée pour piloter les première et deuxième sources lumineuses (2, 3) suivant une séquence d’éclairage comprenant une activation de la première source lumineuse (2), une absence d’activation des première et deuxième sources lumineuses (2, 3) et une activation de la deuxième source lumineuse (3) et pour adresser des signaux de commande au module (5) d’acquisition d’images. (Figure 2)
