Improve gene transfer efficiency in CAR therapy using transposon method. (1) preparing a non-proliferating cell obtained by stimulating a cell population containing T cells with an anti-CD3 antibody and an anti-CD28 antibody and then performing a treatment to lose proliferative capacity (2) (3) mixing the non-proliferating cells prepared in step (1) and the genetically modified T cells obtained in step (2) with each other to prepare a genetically modified T cell into which the target antigen specific chimeric antigen receptor gene has been introduced , Co-culturing with stimulation with an anti-CD3 antibody and an anti-CD28 antibody and (4) recovering the cultured cells, wherein the method comprises the steps of: In addition, (i) a virus peptide antigen obtained by stimulating a cell population containing T cells with an anti-CD3 antibody and an anti-CD28 antibody, followed by treatment in the presence of the viral peptide antigen and treatment to lose proliferative capacity (Ii) obtaining a genetically modified T cell into which a target antigen-specific chimeric antigen receptor gene has been introduced by a transposon method (iii) obtaining a non-proliferating cell prepared in step (i) Mixing the proliferating cells with the genetically modified T cells obtained in step (ii) and co-culturing the transformed cells (iv) recovering the cultured cells. A preparation method is provided.トランスポゾン法を利用したCAR療法における遺伝子導入効率の向上を図る。(1)T細胞を含む細胞集団を抗CD3抗体及び抗CD28抗体で刺激した後、増殖能を喪失させる処理を行うことによって得られる非増殖性細胞を用意するステップ;(2)トランスポゾン法によって、標的抗原特異的キメラ抗原受容体遺伝子が導入された遺伝子改変T細胞を得るステップ;(3)ステップ(1)で用意した非増殖性細胞とステップ(2)で得た遺伝子改変T細胞を混合し、抗CD3抗体及び抗CD28抗体で刺激しつつ共培養するステップ;(4)培養後の細胞を回収するステップを含む、キメラ抗原受容体を発現する遺伝子改変T細胞の調製方法が提供される。また、(i)T細胞を含む細胞集団を抗CD3抗体及び抗CD28抗体で刺激した後、ウイルスペプチド抗原存在下での培養及び増殖能を喪失させる処理を行うことによって得られる、ウイルスペプチド抗原を保持した非増殖性細胞を用意するステップ;(ii)トランスポゾン法によって、標的抗原特異的キメラ抗原受容体遺伝子が導入された遺伝子改変T細胞を得るステップ;(iii)ステップ(i)で用意した非増殖性細胞とステップ(ii)で得た遺伝子改変T細胞を混合し、共培養するステップ;(iv)培養後の細胞を回収するステップを含む、キメラ抗原受容体を発現する遺伝子改変T細胞の調製方法が提供される。
