本发明涉及一种前列腺癌相关融合基因Fish检测方法,对前列腺癌组织石蜡切片进行常规预处理,然后采用双色融合探针进行原位杂交,根据检测到的荧光信号判断是否存在前列腺癌相关融合基因。较佳地,双色融合探针是TMPRSS2/ERG双色融合探针、TMPRSS2/ETV1双色融合探针或TMPRSS2/ETV4双色融合探针,其中TMPRSS2、ERG、ETV1和ETV4分别为为SEQ ID NO:1-4所示的核苷酸序列。还涉及相关的双色融合探针及试剂盒。本发明的前列腺癌相关融合基因Fish检测方法设计巧妙,操作简单,特异性和敏感性均能大幅提高,可以快速、准确、直观检测出前列腺癌相关融合基因,检测结果准确可靠,从而可作为医师诊断前列腺癌的参考依据,适于大规模推广应用。