PROTÉINES DE FUSION COMPRENANT UN DOMAINE DE LIAISON À L'ADN D'UNE PROTÉINE EFFECTRICE TAL ET UN DOMAINE DE CLIVAGE NON SPÉCIFIQUE D'UNE NUCLÉASE DE RESTRICTION ET LEUR UTILISATION
Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH)
发明人:
申请号：
EP11725900.2
公开号：
EP2575439A1
申请日:
2011.06.07
申请国别(地区):
EP
年份:
2013
代理人:
摘要：
The present invention relates to a method of modifying a target sequence in the genome of a eukaryotic cell, the method comprising the step: (a) introducing into the cell a fusion protein comprising a DNA-binding domain of a Tal effector protein and a non-specific cleavage domain of a restriction nuclease or a nucleic acid molecule encoding the fusion protein in expressible form, wherein the fusion protein specifically binds within the target sequence and introduces a double strand break within the target sequence. The present invention further relates to the method of the invention, wherein the modification of the target sequence is by homologous recombination with a donor nucleic acid sequence further comprising the step: (b) introducing a nucleic acid molecule into the cell, wherein the nucleic acid molecule comprises the donor nucleic acid sequence and regions homologous to the target sequence. The present invention also relates to a method of producing a non-human mammal or vertebrate carrying a modified target sequence in its genome. Furthermore, the present invention relates to a fusion protein comprising a DNA-binding domain of a Tal effector protein and a non-specific cleavage domain of a restriction nuclease.La présente invention concerne un procédé de modification d'une séquence cible dans le génome d'une cellule eucaryote, le procédé comprenant l'étape : (a) introduction dans la cellule d'une protéine de fusion comprenant un domaine de liaison à l'ADN d'une protéine effectrice Tal et un domaine de clivage non-spécifique d'une nucléase de restriction, ou d'une molécule d'acide nucléique codant pour la protéine de fusion sous sa forme exprimable, dans lequel la protéine de fusion se lie spécifiquement à l'intérieur de la séquence cible et introduit une cassure double brin à l'intérieur de la séquence cible. La présente invention concerne en outre le procédé de l'invention, dans lequel la modification de la séquence cible se fait par recombinaison homologue
