The present disclosure provides methods for genetically modifying lymphocytes and methods for performing adoptive cellular therapy that include transducing T cells and/or NK cells without prior ex vivo stimulation. The methods typically include engineered signaling polypeptides that can include a lymphoproliferative element, and/or a chimeric antigen receptor (CAR), for example a microenvironment restricted CAR. Additional elements of such engineered signaling polypeptides are provided herein, as well as vectors, such as retroviral vectors, packaging cell lines and methods of making the same. Furthermore, recombinant retroviruses and methods of making the same are provided. Numerous controls are provided, including riboswitches that are controlled, for example in vivo, by nucleoside analogues.La présente invention concerne des procédés permettant de modifier génétiquement des lymphocytes et des procédés permettant d'effectuer une thérapie cellulaire adoptive qui comprend la transduction de lymphocytes T et/ou de cellules tueuses naturelles sans stimulation ex vivo préalable. Les procédés comprennent habituellement des polypeptides de signalisation modifiés qui peuvent comprendre un élément lymphoprolifératif, et/ou un récepteur chimérique d'antigène (CAR), par exemple un CAR limité à un microenvironnement. L'invention concerne également des éléments supplémentaires de tels polypeptides de signalisation modifiés, ainsi que des vecteurs, tels que des vecteurs rétroviraux, des lignées cellulaires d'encapsidation et leurs procédés de préparation. L'invention concerne en outre des rétrovirus recombinés et leurs procédés de préparation. L'invention concerne également de nombreux contrôles, y compris des riborégulateurs qui sont contrôlés, par exemple in vivo, par des analogues de nucléosides.
