本发明提供一组用于羊源性的实时荧光PCR检测的特异性引物和探针,所述特异性引物和探针的核苷酸序列为(1)或(2)中的一种:(1)、上游引物:5'‑TTTGCGACAATAGCCACAGC‑3',下游引物:5'‑ATCGGGTGAGGGTAGCTTTGT‑3' ,探针:5'‑TCATTCTGAGGAGCAACAGTTATTACCAA‑3',所述引物和探针扩增的目标核苷酸序列为序列表中SEQ ID No.3;(2)、与(1)所述序列互补的序列。本发明的引物和探针可对动物饲料和羊肉的羊源性含量进行定性、定量分析,对判断动物饲料和羊肉中羊源性含量具有重要意义,本发明将在食品检测领域发挥重要作用。