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昆虫重组杂交病毒表达载体的构建方法
- 专利权人:
- 浙江大学
- 发明人:
- 吴小锋
- 申请号：
- CN01125605.2
- 公开号：
- CN1167798C
- 申请日:
- 2001.08.10
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2004
- 代理人:
- 林怀禹
- 摘要：
- 一种昆虫重组杂交病毒表达载体的构建方法，利用同源重组的原理，构建了介于AcNPV和BmNPV间的杂交重组病毒表达载体HyNPV。为了减少表达后重组蛋白的降解，利用“基因knock-out”法删除了杆状病毒本身的一种主要蛋白酶-半胱氨酸蛋白酶基因，提高了重组蛋白的稳定性和表达效率。该表达载体较好地解决了BmNPV表达系统寄主范围狭窄及表达后期重组目的产物受蛋白酶降解的问题。它具有寄主范围广，既可感染家蚕，又能感染常用Sf21，Sf9及Tn-5培养细胞；可使用Sf21，Sf9培养细胞代替家蚕细胞加快重组病毒的大量快速制备；由于它对家蚕和常用昆虫培养细胞具有双重感染性，既可利用Sf21，Sf9细胞及大型的Tn-5细胞进行无菌状态下的细胞悬浮培养法快速生产重组蛋白，又可以在家蚕中大量表达，而且重组蛋白生产水平提高50-60％。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
