Described herein are methods for the production of extracellular vesicles comprising culturing a population of producer cells in single-cell suspension, wherein the cells are cultured in chemically-defined culture medium, wherein the culture medium lacks animal-derived serum and animal-derived components； and obtaining from the cell culture an extracellular vesicle preparation comprising extracellular vesicles. In certain embodiments, the methods comprise perfusion culturing methods, including single-cell perfusion culturing methods and batch-refeed culturing methods. The methods described herein are a significant improvement over the state of the art and fulfills an unmet need in the field of extracellular vesicle manufacturing and quality control.L'invention concerne des procédés de production de vésicules extracellulaires consistant à cultiver une population de cellules productrices sous forme d'une suspension de cellules isolées, les cellules étant cultivées dans un milieu de culture chimiquement défini, le milieu de culture étant dépourvu de sérum d'origine animale et de constituants d'origine animale； et à obtenir à partir de la culture cellulaire une préparation de vésicules extracellulaires comprenant les vésicules extracellulaires. Dans certains modes de réalisation, les procédés comprennent des procédés de culture par perfusion, notamment des procédés de culture par perfusion de suspension de cellules isolées et des procédés de culture continue réalimentée par lots. Les procédés décrits dans la description représentent une amélioration considérable par rapport à l'état de la technique et répondent à un besoin non satisfait dans le domaine de la fabrication de vésicules extracellulaires et du contrôle qualité.
