The present disclosure related to isolated laminin-521, methods for making recombinant laminin-521, host cells that express recombinant laminin-521, and compositions containing laminin-521. Laminin-521 can maintain stem cells in vitro pluripotency, enable self-renewal, and enable single cell survival of human embryonic stem cells. When pluripotent human embryonic stem cells are cultured on plates coated with a matrix of recombinant laminin-521 (laminin 11), in the absence of differentiation inhibitors or feeder cells, the embryonic stem cells proliferate and maintain their pluripotency. It has also been discovered that human recombinant laminin-521 (laminin-11) provides single cell survival of stem cells after complete dissociation into a single cell suspension. Useful cell culture mediums containing at most 3.9 ng/ml of beta fibroblast growth factor (bFGF) are also described herein.본 발명은 단리된 라미닌-521, 재조합 라미닌-521의 제조방법, 재조합 라미닌-521을 발현하는 숙주세포, 및 라미닌-521을 함유하는 조성물에 관한 것이다. 라미닌-521은 줄기 세포의 생체 외 다능성을 유지시킬 수 있으며, 자가 재생을 가능하게 하며, 인간 배아 줄기 세포의 단일 세포 생존을 가능하게 한다. 분화 억제제 또는 지지세포의 부존재 하에, 다능성 인간 배아 줄기 세포가 재조합 라미닌-521 (라미닌 11)의 기질로 코팅된 플레이트 상에서 배양될 때, 상기 배아 줄기 세포는 증식하며 그들의 다능성을 유지한다. 인간 재조합 라미닌-521 (라미닌-511)이 단일 세포 현탁액으로의 완전한 해리 후에 줄기 세포의 단일 세포 생존을 제공한다는 점이 또한 발견되었다. 최대 3.9 ng/ml의 베타 섬유아세포 성장인자 (bFGF)를 함유하는 유용한 세포 배양 배지가 또한 본 발명에서 기술되었다.
