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一种抗蓝耳病克隆猪的制备方法
- 专利权人:
- 中国农业大学
- 发明人:
- 李宁,陈婧瑶,李秋艳,胡晓湘,赵要风
- 申请号：
- CN201510009543.4
- 公开号：
- CN104593422A
- 申请日:
- 2015.01.08
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 王文君
- 摘要：
- 本发明提供了一种抗蓝耳病克隆猪的制备方法。采用CRISPR/Cas9打靶载体与CD163基因同源重组修饰载体共转入猪成纤维细胞中，获得阳性细胞克隆，阳性克隆中的猪内源CD163基因的第7个外显子被替换为人CD163-L1基因的第10外显子，使其不具有介导PRRSV入侵的能力；以阳性细胞为核移植供体细胞，卵母细胞为核移植受体细胞，通过体细胞核移植技术获得克隆胚胎；将克隆胚胎移入猪子宫内妊娠获得克隆猪。本发明方法成本低，大幅缩短获得纯合子猪的时间，并保证CD163的表达不受基因编辑的影响，为大动物利用CRISPR/Cas9技术介导同源重组进行基因功能研究及疾病模型建立奠定了基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
