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整合O型口蹄疫病毒shRNA转基因克隆猪的制备方法
- 专利权人:
- 石河子大学
- 发明人:
- 陈创夫,欧阳红生,乔军,赛务加甫,马铈委,王鹏燕
- 申请号：
- CN201210192040.1
- 公开号：
- CN102703392A
- 申请日:
- 2012.06.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 王薇
- 摘要：
- 本发明涉及一种整合O型口蹄疫病毒shRNA转基因克隆猪的制备方法，其特征在于：利用RNA干扰和转基因克隆技术制备抗O型口蹄疫病毒复制转基因克隆猪的方法，针对O型口蹄疫病毒VP1和3D基因共设计了16对shRNA,构建干扰载体16个；将干扰载体转染BHK-21细胞并对转染细胞攻毒，提取攻毒后细胞的RNA，反转录为cDNA，通过Real-timePCR筛选出两个表达质粒抑制口蹄疫病毒复制的效率最好；用组织块法分离了猪胎儿成纤维细胞，筛选出阳性细胞作为核移植的供体细胞；成功培养猪卵母细胞，利用胚胎移植将重构胚胎移入受体母猪子宫，受体母猪自然分娩获得抗口蹄疫转基因克隆仔猪，检测结果表明转基因克隆仔猪具有抑制O型口蹄疫病毒复制的能力。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
