Provided herein are methods for producing engineered T cells that express a recombinant receptor, such as for use in cell therapy. In some aspects, the provided methods include one or more steps for incubating the cells under stimulating conditions, introducing a recombinant polypeptide to the cells through transduction or transfection, and/or cultivating the cells under conditions that promote proliferation and/or expansion, in which one or more steps is carried out in the presence of an agent that inhibits mammalian target of rapamycin (mTOR) activity. In some aspects, cultivation is performed in the presence of an agent that inhibits mammalian target of rapamycin (mTOR) activity. In some aspects, the provided methods produce genetically engineered T cells with improved persistence and/or anti-tumor activity in vivo.La présente invention concerne des procédés pour la production de lymphocytes T modifiés qui expriment un récepteur recombiné, par exemple destinés à être utilisés en thérapie cellulaire. Dans certains aspects, les procédés selon l'invention comprennent une ou plusieurs étapes consistant à incuber les cellules dans des conditions de stimulation, introduire un polypeptide recombiné dans les cellules par transduction ou transfection et/ou effectuer la culture des cellules dans des conditions qui favorisent la prolifération et/ou l'expansion, une ou plusieurs étapes étant réalisées en présence d'un agent qui inhibe l'activité de la cible de la rapamycine chez les mammifères (mTOR). Dans certains aspects, la culture est réalisée en présence d'un agent qui inhibe l'activité de la cible de la rapamycine chez les mammifères (mTOR). Selon certains aspects, les procédés selon l'invention produisent des lymphocytes T génétiquement modifiés présentant une persistance améliorée et/ou une activité antitumorale in vivo améliorée.
