哺乳动物细胞表达启动子及其制造和使用方法
- 专利权人:
- 孙浩
- 发明人:
- 张春波,孙浩
- 申请号：
- CN201611139166.7
- 公开号：
- CN106754921A
- 申请日:
- 2016.12.12
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 汤东凤
- 摘要：
- 本发明公开了一种哺乳动物细胞表达启动子及其制造和使用方法，该方法包括以下步骤：步骤一，通过化学合成的方式合成引物；步骤二，通过PCR反应，获得启动子序列；步骤三，通过限制性酶切位点：BglII 和Kpn1，上述启动子序列插入包含有ori、卡纳抗性基因、sv40、sv40 polyA、多酶切位点序列的质粒骨架中，得到 pHep/L1质粒；步骤四，转染入E.Coli大肠杆菌进行质粒扩增，提取质粒，进行测序；步骤五，将新获得的质粒插入SEAP和IL10目的基因，通过CsCL密度梯度离心法提取纯净质粒。本发明提高现有质粒和AAV病毒的表达效率。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
