This invention the protein is revealed, as the enclosure body new method for large-scale refinement of rearrangement person GCSF of remedy class from microbial cell is stated. The enclosure body is solubilized under oxidation restoration condition, at the same time re-folding is done. Oxidation restoration condition is offered by using asukorubin acid, dehydroascorbic acid and the restoration glutathione. This method includes the new use of water quarter-phase extraction process in order to refine GCSF which re-folding is done after the removing the denaturant. After this process, it refines in order to remove the impurity which furthermore, is related GCSF making use of chromatography technology. GCSF which is obtained is necessary for the method of production scale, it possesses satisfactory purity and yield. The protein, it seems like DNA and the endotoxin, the contaminant which it is related to the host cell, decreases making use of the refinement method of this invention.本発明は、タンパク質が封入体として発現される、微生物細胞からの治療等級の組み換えヒトGCSFの大規模精製のための新規な方法を記載する。封入体は、酸化還元条件下で可溶化され、かつ再折り畳みされる。酸化還元条件は、アスコルビン酸、デヒドロアスコルビン酸および還元グルタチオンを用いることによって提供される。この方法は、変性剤の除去後に再折り畳みされたGCSFを精製するための水性二相抽出工程の新規の使用を含む。この工程の後、GCSFをさらに、関連する不純物を除去するためにクロマトグラフィー技術を用いて精製する。得られたGCSFは、製造規模の方法にとって必須である、良好な純度および収率を有する。タンパク質、DNAおよび内毒素のような、宿主細胞に関連する混入物が、本発明の精製方法を用いて減少する。
