INSTITUTE OF GENETICS AND DEVELOPMENTAL BIOLOGY; CHINESE ACADEMY OF SCIENCES
发明人:
GAO, Caixia,高彩霞,JI, Xiang,姬祥,ZHANG, Huawei,张华伟
申请号：
CNCN2016/076246
公开号：
WO2016/141893A1
申请日:
2016.03.14
申请国别(地区):
WO
年份:
2016
代理人:
摘要：
Provided is a method for increasing the ability of a plant to resist a DNA virus, said method comprising the following steps: 1) selecting a sequence from the genome sequence of a DNA virus to be a target sequence, said sequence conforming to a 5-NX-NGG-3 or 5-CCN-NX-3 arrangement rule, and synthesising a DNA fragment which is reversely complementary to the target sequence 2) constructing the DNA fragment into a vector used for expressing the CRISPR/Cas9 nuclease, and obtaining a recombinant vector capable of transcribing a guide RNA and expressing the Cas9 protein 3) introducing the recombinant vector to a recipient plant. The method of the present invention may be widely applied to double-stranded DNA viruses and single-stranded DNA viruses using double-stranded DNA as an intermediate, wherein the sequences of the DNA viruses are known.La présente invention concerne un procédé daugmentation de la capacité dune plante à résister à un virus à ADN, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : 1) sélection dune séquence à partir de la séquence génomique dun virus à ADN pour être une séquence cible, ladite séquence se conformant à une règle de configuration 5-NX-NGG-3 ou 5-CCN-NX-3, et la synthèse dun fragment dADN qui est inversement complémentaire de la séquence cible 2) construction du fragment dADN en un vecteur utilisé pour lexpression de la CRISPR/Cas9 nucléase, et obtention dun vecteur recombinant capable de transcription dun ARN guide et expression de la protéine Cas9 3) introduction du vecteur recombinant dans une plante bénéficiaire. Le procédé de la présente invention peut être largement appliqué aux virus à ADN double brin et aux virus à ADN simple brin en utilisant lADN double brin comme intermédiaire, où les séquences des virus à ADN sont connues.
