BERTOZZI, Carolyn,AGARWAL, Paresh,SLETTEN, Ellen, M.
申请号：
USUS2013/070421
公开号：
WO2014/078733A1
申请日:
2013.11.15
申请国别(地区):
WO
年份:
2014
代理人:
摘要：
Aldehyde- and ketone-functionalized proteins are promising new substrates for the development of chemically modified biotherapeutics and protein-based materials. Their reactive carbonyl groups are typically conjugated with a-effect nucleophiles, such as substituted hydrazines and alkoxyamines, to generate hydrazones and oximes, respectively. However, the resulting C=N linkages are susceptible to hydrolysis under physiologically relevant conditions, which limits their utility in biological systems. Here we introduce a Pictet-Spengler ligation that is based on the classic Pictet-Spengler reaction of aldehydes and tryptamine nucleophiles. The ligation exploits the bioorthogonal reaction of aldehydes and alkoxyamines to form an intermediate oxyiminium ion this intermediate undergoes intramolecular C-C bond formation with an indole nucleophile to form an oxacarboline product that is hydrolytically stable. The reaction was utilized for site-specific chemical modification of glyoxal- and formylglycine-functionalized proteins, including an aldehyde-tagged variant of the therapeutic monoclonal antibody Herceptin. In conjunction with techniques for site-specific introduction of aldehydes into proteins, the Pictet-Spengler ligation offers a new means to generate stable bioconjugates for medical and materials applications.Les protéines fonctionnalisées par aldéhyde ou cétone sont de nouveaux substrats prometteurs pour le développement de produits bio-thérapeutiques chimiquement modifiés et des matériaux à base de protéines. Leurs groupes carbonyles réactifs sont typiquement conjugués avec de nucléophiles à effet alpha, telles que des hydrazines et des alcoxyamines substituées, pour générer des hydrazones ou des oximes, respectivement. Cependant, les liaisons C=N qui en résultent sont susceptibles à lhydrolyse dans des conditions physiologiquement pertinentes, ce qui limite leur utilité dans des systèmes biologiques. La présente invention concerne donc une nouvelle ligature Pict
