The invention provides improved methods to prepare protein conjugates from a ketone-modified protein. In one embodiment, the protein is prepared by linking two free cysteines by reaction with a 1,3-dihaloacetone or similar ketone-containing reactant, linking the sulfur atoms of the two cysteines together. The ketone inserted between the sulfur atoms is then used to form an oxime, thus conjugating the protein to a payload. In another embodiment, two cysteine residues are tied together by reaction with a 1,3-dihaloacetone or similar reactant, and the new ketone is used to form an oxime with a suitable payload molecule, thus conjugating the protein to a payload. The method provides improved reaction conditions for the oxime formation, whereby higher yields and Improved product homogeneity are achieved.La présente invention concerne des procédés améliorés de préparation de conjugués protéiques à partir d'une protéine à modification cétone. Dans un mode de réalisation, la protéine est préparée par liaison de deux cystéines libres par réaction avec une 1,3-dihaloacétone ou un réactif similaire contenant une cétone, en liant les atomes de soufre des deux cystéines ensemble. La cétone insérée entre les atomes de soufre est alors utilisée pour former une oxime, conjuguant ainsi la protéine à une charge. Dans un autre mode de réalisation, les deux résidus cystéine sont liés l'un à l'autre par une réaction avec une 1,3-dihaloactéone ou un réactif similaire, et la nouvelle cétone est utilisée pour former une oxime avec une molécule de charge adaptée, conjuguant ainsi la protéine à une charge. Le procédé fournit des conditions de réaction améliorées pour la formation d'oxime, permettant des rendements plus élevés et une meilleure homogénéité des produits.
