本发明公开了一种大弹涂鱼amylin抗菌肽及其编码序列和用途与制备方法,大弹涂鱼amylin基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码的蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了该基因编码的蛋白C端来源的抗菌肽及其用途和制备方法。从大弹涂鱼的基因组序列中,基于同源比对的方法,识别出大弹涂鱼amylin基因的核酸编码序列,制备的大弹涂鱼amylin抗菌肽由37个氨基酸组成,具有良好的抑制藤黄微球菌生长的活性。本发明提供的大弹涂鱼amylin基因及其编码的蛋白序列,以及该蛋白C端的一个多肽在抑制微生物生长中的应用,在开发高效安全的抗生素替代品方面具有重要应用价值。