本发明公开了一种合方鲫ITLN蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,或者是SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个氨基酸和/或末端修饰得到的具有同等或更高活性的蛋白。该合方鲫ITLN蛋白的发现不仅丰富了合方鲫的基因库,而且可以应用于制备重组蛋白,进一步应用于抑制嗜水气单胞菌和/或无乳链球菌生长、制备水产动物的免疫制剂或饲料添加剂,为合方鲫的生理免疫研究提供了新的实践基础。本发明还公开了一种合方鲫ITLN蛋白的制备方法,以及该合方鲫ITLN蛋白在抑制嗜水气单胞菌和/或无乳链球菌生长、制备水产动物的免疫制剂或饲料添加剂中的应用。