本发明公开了一种胶原特异结合的单链抗体、其编码基因及应用。在一较佳实施例中,该单链抗体(CBD-scFv)主要由胶原特异结合多肽CBD与西妥昔单抗(cetuximab)的scFv功能区融合形成。进一步的,所述胶原特异结合的单链抗体是由具有SEQ ID NO:1所示序列的基因编码形成。本发明通过基因工程方法将胶原结合区CBD多肽与西妥昔单抗的功能区scFv融合,并优选利用酵母表达系统,经体外实验和体内实验证明,CBD-scFv可以与胶原机构特性结合,并且保持了cetuximab与肿瘤细胞表面的EGFR结合能力,在体外对肿瘤具有很好的杀伤效果,在体内CBD-scFv可以靶向性的在胶原富集的肿瘤发生部位聚集,并且相对于全长抗体能更快的靶向到肿瘤部位,在肿瘤靶向治疗和载药领域有良好应用前景。