本发明提供一种用于耐甲氧西林和/或耐红霉素金黄色葡萄球菌检测的组合物,包括,引物对SEQ ID NO.1/2,引物对SEQ ID NO.3/4,SEQ ID NO.5/6和SEQ ID NO.7/8。使用本发明所述的组合物及相应检测方法对金黄色葡萄球菌进行菌属鉴定的同时,可同时检测MRSA及红霉素耐药基因,具有快速高通量等优点,满足了食品中微生物检测迅速准确的需求。使用本发明所建立的mPCR-DHPLC/电泳方法可以在一次检测中即同时鉴定样品中的金黄色葡萄球菌、MRSA及耐红霉素金黄色葡萄球菌。并且检测耗时短,操作简捷,可以节省大量的劳力和财力,适合快速检测的要求。