O型口蹄疫病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用,属于基因工程学和免疫学领域,解决了现有灭活口蹄疫疫苗存在的安全性差、使用效果不理想的问题。该疫苗的氨基酸序列如序列表中的SEQ ID NO:1所示,编码该氨基酸序列的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID NO:2所示。该疫苗免疫后可诱导动物同时产生抗O型口蹄疫的抗体,该疫苗是以病毒样颗粒形式存在,口蹄疫病毒VP1表位在病毒样颗粒的表面,本发明提供了构成病毒样颗粒疫苗的氨基酸序列和编码该氨基酸序列的核苷酸序列,且所述的核苷酸序列含有能够在表达中自我组装成病毒样颗粒的外壳蛋白全部基因。本发明提供的O型口蹄疫病毒样颗粒疫苗制备安全性好,无病毒返强、散毒的可能性;免疫有效期长,运输储存方便。