Compositions and methods of producing vaccines, including methods wherein whole organism vaccines are provided with limited replication abilities, thereby increasing vaccine safety and efficacy, through the use of non-natural, unnatural, or non-naturally encoded amino acids.La presente invención se refiere a composiciones y métodos de producción de vacunas, incluyendo métodos en los que se dotan unas vacunas de organismos completos de capacidades limitadas de replicación, aumentando de ese modo la seguridad y la eficacia de la vacuna, a través del uso de aminoácidos no naturales o no codificados de manera natural. Una célula bacteriana que contiene un aminoácido no-natural, en donde la célula bacteriana es una célula del bacilo Johne (MAP), y el aminoácido no-natural ha sido incorporado específicamente en sitio en la secuencia de aminoácidos de un producto génico requerido para replicación donde dicha célula es capaz de replicación únicamente en la presencia de dicho aminoácido no-natural, y tiene una capacidad limitada o ninguna capacidad de replicación en ausencia de dicho aminoácido no-natural.
