Compositions and methods of producing vaccines, including methods wherein whole organism vaccines are provided with limited replication abilities, thereby increasing vaccine safety and efficacy, through the use of non-natural, unnatural, or non-naturally encoded amino acids.La presente invención se refiere a composiciones y métodos de producción de vacunas, incluyendo métodos en los que se dotan unas vacunas de organismos completos de capacidades limitadas de replicación, aumentando de ese modo la seguridad y la eficacia de la vacuna, a través del uso de aminoácidos no naturales o no codificados de manera natural. La vacuna para usarse en inducir una respuesta inmune o reducir el riesgo de una infección E. coli en un animal no-humano.