An in vitro process for the production of closed linear deoxyribonucleic acid (DNA) comprises (a) contacting a DNA template comprising at least one protelomerase target sequence with at least one DNA polymerase in the presence of one or more primers under conditions promoting amplification of said template and (b) contacting amplified DNA produced in (a) with at least one protelomerase under conditions promoting production of closed linear DNA. A kit provides components necessary in the process.閉鎖型直鎖状デオキシリボ核酸(DNA)の製造のためのin vitro無細胞法は、以下のステップ:(a)少なくとも1つのプロテロメラーゼ標的配列を含むDNA鋳型を、該鋳型の増幅を促進する条件下で、少なくとも1種のプライマーの存在下で、少なくとも1種のDNAポリメラーゼと接触させるステップ;および(b)閉鎖型直鎖状DNAの製造を促進する条件下で、ステップ(a)で生成された増幅されたDNAを、少なくとも1種のプロテロメラーゼと接触させるステップを含む。キットは、該方法において必要な構成要素を提供する。【選択図】なし