(A) contacting a DNA template comprising one or more proteomarrase target sequences with one or more DNA polymerase enzymes in the presence of one or more primers under conditions that promote amplification of the template; And (b) contacting the amplified DNA prepared in (a) with one or more proteolmarases under conditions that promote the production of closed linear DNA. To provide a method for in vitro in vitro production of ribonucleic acid (DNA). To a kit for providing components necessary for the method.본 발명은 (a) 주형의 증폭을 촉진시키는 조건 하에, 하나 이상의 프로텔로머라제 타겟 서열을 포함하는 DNA 주형과, 1종 이상의 DNA 중합효소를, 하나 이상의 프라이머 존재 중에 접촉시키는 단계; 및 (b) 상기 (a)에서 제조되는 증폭된 DNA에, 1종 이상의 프로텔로머라제를 닫힌 선형 DNA의 제조를 촉진하는 조건 하에 접촉시키는 단계를 포함하는, 닫힌 선형(closed linear) 데옥시리보핵산(DNA)의 시험관내 무세포성 제조 방법을 제공한다. 상기 방법에 필요한 성분을 제공하는 키트에 관한 것이다.