本发明提供了一种草菇呈味肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了上述的一种草菇呈味肽的制备方法,首先通过高压蒸煮从草菇中提取水溶性成分;采用纳滤膜分离截留分子量在200Da和1000Da之间的超滤组分;对所述的超滤组分进行分离纯化后获得氨基酸序列为如SEQ ID NO.1所示的草菇呈味肽。本发明还提供了上述的草菇呈味肽在食品中的应用。本发明还提供了一种食品调味料,含有上述的草菇呈味肽。本发明的草菇呈味肽作为呈味物质的一种,应用于食品领域。本发明研究发现,利用本实施例制备的草菇呈味肽进行美拉德反应,能获得具有良好的风味增强效果的草菇美拉德反应肽。