一种用于检测绵羊肺腺瘤病毒的Taqman Real-time RT-PCR试剂盒,所述试剂盒包含One Step RT-PCR buffer、酶混合物、阳性对照、无RNA酶水、序列SEQ ID NO:1和 SEQ ID NO:2的引物及SEQ ID NO:3的探针引物的混合物,所述检测方法包括使用所述试剂盒进行RT-PCR扩增的步骤及评定标准。所述方法能快速、敏感、准确以及低成本地对绵羊肺腺瘤病毒进行检测及定量分析。本发明设计了特异性针对绵羊肺腺瘤病毒的引物及探针,优化并组装成试剂盒。与普通RT-PCR方法相比,本发明省时、省力,成本较低。