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一种猪Sox6蛋白的体外表达及其多克隆抗体的制备方法
- 专利权人:
- 四川农业大学
- 发明人:
- 黄志清,陈小玲,徐孟,温万雪,王晓燕,常帅,陈代文,余冰
- 申请号：
- CN201410553886.2
- 公开号：
- CN104357474A
- 申请日:
- 2014.10.17
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 裴娜
- 摘要：
- 本发明公开了一种猪Sox6蛋白的体外表达、多克隆抗体的制备的方法。该体外表达方法包括：设计引物PCR扩增猪Sox6基因；构建大肠杆菌重组表达载体pET-30a(+)-pSox6；将构建的且经DNA测序鉴定正确的重组表达载体pET-30a(+)-pSox6转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中；构建猪Sox6重组表达菌株；通过重组菌株诱导表达条件的优化最大限度的获得重组猪Sox6蛋白；镍柱亲和层析法纯化得到高纯度的重组猪Sox6蛋白。多克隆抗体的制备包括：以纯化的重组猪Sox6蛋白为抗原多次注射免疫大鼠获得猪Sox6多克隆抗体，采用ELISA法测定抗体效价和Western blot法鉴定抗体特异性。通过本发明方法，实现了猪Sox6蛋白的体外表达和制备出了抗体效价高、抗体特异性良好的猪Sox6多克隆抗体，完全可以满足相关实验的需要。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
