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利用CRISPR/Cas9敲除文库技术筛选JEV抗性基因的方法与靶点
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 赵书红,谢胜松,李新云,赵长志,刘海龙,肖天贺,王子畅,聂雄伟,韩晓松,阮进学
- 申请号：
- CN201911040376.4
- 公开号：
- CN110592172A
- 申请日:
- 2019.29.10
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2019
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明提供了利用CRISPR/Cas9敲除文库技术筛选JEV抗性基因的方法与靶点。具体地,本发明提供了一种基于全基因组CRISPR/Cas9敲除文库策略,筛选JEV抗性相关基因的方法及候选靶基因。本发明方法先利用一个包含有针对猪全基因组的sgRNA质粒库包装慢病毒,感染Cas9稳定表达的猪体细胞,通过流式细胞术富集获得全基因组基因敲除细胞库。再利用JEV感染敲除细胞库,收集存活细胞,提取基因组DNA并进行PCR扩增,建库和高通量测序,最后利用生物信息学分析获得数十个JEV抗性候选功能基因。本发明建立了基于全基因CRISPR/Cas9敲除文库策略筛选猪的JEV抗病基因的方法,所鉴定的候选基因靶点可用于抑制JEV复制的靶向药物开发与抗病育种研究。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
