non-human animal, and methods for testing and for optimizing the ability of a crispr / cas nuclease to excise a genomic nucleic acid in vivo, to test the crispr / cas-induced recombination of a genomic acid with an exogenous donor nucleic acid in vivo and to optimize the ability of crispr / cas to induce recombination of a genomic nucleic acid with an exogenous donor nucleic acid in vivo.
ANDREW J. MURPHY,BRIAN ZAMBROWICZ,CHARLEEN HUNT,DAVID FRENDEWEY,GUOCHUN GONG,SUSANNAH BRYDGES,SUZANNE HARTFORD
申请号：
BR112020001996
公开号：
BR112020001996A2
申请日:
2018.07.31
申请国别(地区):
BR
年份:
2020
代理人:
摘要：
methods and compositions are provided to assess the crispr / cas-mediated non-homologous (nhej) end-junction activity and / or crispr / cas-induced recombination of a target genomic locus with an exogenous donor nucleic acid in vivo or ex vivo. the methods and compositions employ non-human animals comprising a crispr reporter, such as a genomically integrated crispr reporter to detect and measure the targeted excision of a sequence between two crispr / cas nuclease cleavage sites or disrupt a sequence close to a site of crispr / cas nuclease cleavage and / or measuring crispr / cas-induced recombination of the crispr reporter with an exogenous donor nucleic acid to convert the coding sequence to a first reporter protein in the coding sequence to a different second reporter protein . methods and compositions are also provided to produce and use these non-human animals.métodos e composições são providos para avaliar a atividade da união de extremidade não homóloga (nhej) mediada por crispr/cas e/ou recombinação induzida por crispr/cas de um locus genômico alvo com um ácido nucleico de doador exógeno in vivo ou ex vivo. os métodos e composições empregam animais não humanos compreendendo um repórter de crispr, tal como um repórter de crispr genomicamente integrado para detectar e medir a excisão visada de uma sequência entre dois sítios de clivagem por crispr/cas nuclease ou disromper uma sequência próxima a um sítio de clivagem por crispr/cas nuclease e/ou medir a recombinação induzida por crispr/cas do repórter de crispr com um ácido nucleico de doador exógeno para converter a sequência de codificação para uma primeira proteína repórter na sequência de codificação para uma segunda proteína repórter diferente. métodos e composições também são providos para produzir e usar esses animais não humanos.
