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一种基于CRISPR/Cas9高通量技术筛选药物靶点基因的方法
- 专利权人:
- 同济大学
- 发明人:
- 蒋征,刘小乐
- 申请号：
- CN201610807508.1
- 公开号：
- CN106399377A
- 申请日:
- 2016.09.07
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2017
- 代理人:
- 褚明伟
- 摘要：
- 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9高通量技术筛选药物靶点基因的方法，首先建立sgRNA文库；然后用慢病毒包装sgRNA文库，并收集病毒；之后在癌细胞系中筛选sgRNA文库；再提取筛选所得细胞及筛选前细胞的基因组DNA；最后富集基因组DNA中的sgRNA。与现有技术相比，本发明对CRISPR/Cas细胞的筛选过程做了改进，利用被感染细胞的puromycin抗性，用简便的方法确定了病毒感染效率，确定了病毒MOI值；更重要的是，本发明极大优化了病毒包装方法，将病毒包装效率提高至常规方法的5倍以上，能够大大节省大规模的药物靶点筛选成本，用于推动癌症药物靶点筛选的产业化。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
