Methods for producing cell lines with high levels of biologically active recombinant vitamin K dependent proteins are described. The transfected cell lines do not include heterologous genes for processing enzymes and are not subject to selection pressure such as methotrexate resistance. Cell lines producing Factor VII/VIIa and Factor IX are described. These cell lines can be used for isolation of Factor VII/VIIa and/or Factor IX for treatment of Hemophilia.生物学的に活性な組換えビタミンK依存性タンパク質を高レベルで産生する細胞株の作製法が記載される。トランスフェクトした細胞株は酵素をプロセシングする外来性遺伝子を含有せず、メトトレキサート耐性のような選択圧を施与しない。第VII/VIIa因子および第IX因子を産生する細胞株も記載される。それらの細胞株を用いて、血友病治療のための第VII/VIIa因子および/または第IX因子を単離することができる。