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一种利用Tn7转座元件整合表达外源蛋白的重组枯草芽孢杆菌构建方法
- 专利权人:
- 南宁市新科健生物技术有限责任公司
- 发明人:
- 周礼芹,蒙健宗,徐月梅,成春燕
- 申请号：
- CN201510467499.1
- 公开号：
- CN105063078A
- 申请日:
- 2015.08.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 王素娥
- 摘要：
- 本发明公开了一种利用Tn7转座元件整合表达外源蛋白的重组枯草芽孢杆菌构建方法，具体是构建含有抗生素抗性基因、转座子Tn7左右臂盒子、多克隆位点以及Tn7转座酶TnsABCD片段，以及含有大肠杆菌复制子pBR322 ori和枯草芽孢杆菌温敏复制子的转座整合表达质粒；将枯草芽孢杆菌启动子、信号肽、外源蛋白基因等表达元件插入该转座整合表达质粒，转化到枯草芽孢杆菌宿主，使外源蛋白基因整合到枯草芽孢杆菌glms基因下游3’端的attTn7位点进行表达；并通过变温培养使质粒上的温度敏感复制子失去作用，得到不再保留含有抗生素抗性基因和Tn7转座酶的整合质粒的重组枯草芽孢杆菌。本发明的优点是获得稳定的外源基因转座整合，并且重组菌不含抗生素抗性基因，达到食品安全要求。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
