A method for producing an epithelial cell sheet, said method comprising a step for cultivating cells, which are derived from oral mucosal epithelial cells, in a serum-free medium on a substrate, wherein the serum-free medium contains: (i) EGF protein or KGF protein (ii) a B-27 supplement and (iii) an ROCK inhibitor.Linvention concerne un procédé de production dune feuille de cellules épithéliales, ledit procédé comprenant une étape de culture de cellules issues de cellules épithéliales de la muqueuse buccale, dans un milieu exempt de sérum sur un substrat, ce milieu contenant : (i) une protéine EGF ou une protéine KGF (ii) un supplément de B-27 et (iii) un inhibiteur de ROCK.口腔粘膜上皮細胞由来の細胞を、無血清培地中、基材上で培養する工程を含む上皮細胞シートの製造方法であって、前記無血清培地が(i)EGFタンパク質またはKGFタンパク質、(ii)B-27サプリメント、及び(iii)ROCK阻害剤を含む無血清培地である、方法。