The present invention relates to non-naturally occurring L-Asparaginases mutants particularly Type II Escherichia coli L-asparaginase (Ec A) mutants comprising at least one mutation in the amino-acid sequence of wild-type Ec A, wherein such mutation causes the mutants to induce significantly lesser immunogenicity, higher stability and higher cytotoxicity against leukemic cells as compared to wild-type Ec A. The present invention also provides use of the Ec A mutants as anti-leukemic agents for treatment of Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) in a subject in need thereof.Linvention concerne des L-asparaginases mutées qui nexistent pas à létat naturel, en particulier les L-asparaginases mutées dEscherichia coli (Ec A) de type II comprenant au moins une mutation dans la séquence dacides aminés dEc A du type sauvage, ladite mutation suscitant chez les mutants linduction dune immunogénicité significativement plus faible, une plus grande stabilité et une plus grande cytotoxicité contre les cellules leucémiques par rapport à Ec A du type sauvage. Linvention concerne également lutilisation de dEc A mutés comme agents anti-leucémiques pour le traitement de la leucémie lymphoblastique aiguë chez un sujet en ayant besoin.