The present invention relates to a method for producing a mesenchymal stem cell culture medium containing a high concentration of cell growth factors and a composition obtained therefrom, the method comprising: (a) culturing mesenchymal stem cells; (b) collecting mesenchymal stem cells cultured in two or more passages and culturing the cells in a serum-free medium in a three-dimensional culture with a biocompatible scaffold; And (c) collecting the culture medium. According to the method of the present invention, the cells can be stably maintained for a long period of time to produce a large amount of cell culture liquid. The stem cell culture liquid composition obtained according to the method of the present invention The content of the cell growth factor is markedly increased as compared with the composition produced according to the conventional method, so that it is more suitable for clinical use and particularly excellent in clinical use including wound healing and cosmetic composition.본 발명은 고농도의 세포성장인자를 포함하는 중간엽 줄기세포 배양액의 제조방법 및 이로부터 얻어진 조성물에 관한 것으로, (a) 중간엽 줄기세포를 배양하는 단계; (b) 2 계대 이상 배양한 중간엽 줄기세포를 수집하여 무혈청 배지에서 생체적합성 스캐폴드와 3차원 배양하는 단계; 및 (c) 배양 배지를 수집하는 단계를 포함하는 본 발명의 방법에 따르면, 장기간 동안 세포를 안정하게 유지할 수 있어 다량의 세포배양액을 생산할 수 있으며, 본 발명의 방법에 따라 얻어지는 줄기세포 배양액 조성물은 종래의 방법에 따라 생산된 조성물에 비해 세포성장인자의 함량이 획기적으로 증가되어 임상적 용도로 더욱 적합하고, 특히 상처 치유나 화장품 조성물을 포함하는 임상적 용도에서 우수성이 있다.