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少根根霉葡萄糖淀粉酶基因及其内含子的人工剪接方法
- 专利权人:
- 南开大学
- 发明人:
- 李明刚,杨立泉,戴小军,侯建华
- 申请号:
- CN200610014589.6
- 公开号:
- CN100529084C
- 申请日:
- 2006.07.03
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2009
- 代理人:
- 侯 力
- 摘要:
- 由于根霉葡萄糖淀粉酶具有100%降解生淀粉以及降解产物中非发酵性糖类少的优点,在酒精发酵工业中具有十分重要的应用价值。本发明首次从少根根霉中成功地克隆了少根根霉葡萄糖淀粉酶基因(RAGA),并通过PCR技术人工剪除其内含子,构建了可在不同宿主中高效表达的RAGA基因。将本发明中的RAGA基因克隆到pPIC9表达载体,转化毕赤酵母,获得的工程菌株表达了有活性的葡萄糖淀粉酶蛋白。本发明的内含子人工剪接方法简便易行,准确可靠,为难以通过RT-PCR方法和cDNA文库技术克隆基因编码序列而易于获得其基因组DNA时人工剪除内含子,获得可在不同宿主中表达的基因开辟了一条新的途径。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/